MJD1基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的表达

• 作 者: 汤建光 唐北沙 沈璐 江泓 胡治平 曹立 夏昆
• 机 构: 中南大学湘雅医院神经内科,中南大学湘雅医院神经内科,中南大学湘雅二医院神经内科,中南大学医学遗传学国家重点实验室
• 出 处: 中南大学学报：医学版
• 发表日期: 2005年6期
• 关键词: MJD1 ATAXIN-3 脊髓小脑型共济失调Ⅲ型/马查多-约瑟夫病 核内蛋白聚合体 MJD1 ataxin-3 spinocrebellar atax
• 基金项目: 国家科技攻关项目，中国科学院资助项目

目的:分别构建野生型MJD1以及CAG三核苷酸重复扩展突变型MJD1的真核表达载体;明确ataxin-3的多聚谷氨酰胺扩展突变是否可导致细胞核内蛋白聚合体形成.方法:分别以pAS2-1-MJD20Q和pAS2-1-MJD68Q为模板,通过PCR扩展野生型MJD1以及CAG三核苷酸重复扩展突变型MJD1的编码序列.PCR产物经Bam HI和Hind III双酶切后连入pcDNA3.1-Myc-His(-)B,通过酶切以及DNA测序鉴定重组质粒pcDNA3.1-Myc-His(-)B-MJD20Q和pcDNA