半巢式RT-Realtime PCR方法检测藜草花叶病毒

• 作 者: 贺丽娜 李金庆 厉艳 粟智平 封立平 鲁闽 段效辉 王颖 刘宁
• 机 构: 蓬莱检验检疫综合技术服务中心,山东烟台,265600烟台出入境检验检疫局检验检疫技术中心,山东烟台,264000;山东检验检疫技术中心,山东青岛,266002
• 出 处: 安徽农业科学
• 发表日期: 2019年2期
• 关键词: 藜草花叶病毒 半巢式实时荧光PCR 检测

[目的]根据藜草花叶病毒 (SoMV) 全基因组中多聚蛋白质基因序列保守区, 分别设计2套TaqMAN探针和引物, 建立半巢式实时荧光PCR检测SoMV的新方法.[方法]提取病毒核酸进行反转录操作合成cDNA, 依据设计好的2套TaqMAN探针和引物, 分别进行实时荧光PCR特异性与灵敏度检测, 并进行2套引物探针的扩增效率对比试验.[结果]方法特异性强, 灵敏度高达0.4 fg/μL植物总RNA, 2套引物探针的扩增效率试验对比结果显示扩增效率几乎完全一样.[结论]该方法适用于藜草花叶病毒的检疫鉴定.