【摘 要】
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目的根据特异性结合β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)的α-倒捻子素,筛选发现具有抑制Aβ聚集能力的模拟寡肽,阐明其作用机制。方法通过噬菌体展示技术筛选具有竞争α-倒捻子素
【机 构】
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舟山医院药剂科; 杭州博麦医药科技有限公司研发部; 浙江中医药大学动物实验研究中心;
【基金项目】
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舟山市医药卫生科技计划(2015G02)
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目的根据特异性结合β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)的α-倒捻子素,筛选发现具有抑制Aβ聚集能力的模拟寡肽,阐明其作用机制。方法通过噬菌体展示技术筛选具有竞争α-倒捻子素与Aβ特异性结合的模拟肽,分析同源序列;根据特征同源序列,合成寡肽;采用光学表面等离子共振技术检测合成寡肽与Aβ的结合力;用特异性检测Aβ聚集程度的荧光素硫磺素T,检测合成寡肽抑制Aβ聚集的能力;采用分子对接技术,对Aβ进行定点突变,探讨合成寡肽抑制Aβ聚集的机制。结果噬菌体展示技术筛选获得特征同源序列DPN(N为酸性或碱性氨基酸);根据此特征同源序列合成的寡肽,能特异性结合Aβ;其中DPH能显著性的抑制Aβ的聚集,其作用机制与破坏Aβ分子内第23位天冬氨酸(D23)与第28位赖氨酸(K28)之间的分子内盐桥有关。结论具有特征性序列DPN的寡肽能竞争α-倒捻子素与Aβ的特异性结合,其中DPH可通过破坏Aβ分子内D23与K28之间的分子内盐桥,显著性的抑制Aβ的聚集。
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