【摘 要】
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目的探讨抗菌肽hCAP18/LL-37在卵巢癌微环境中的作用及表达调控机制。方法采用侵袭实验检测巨噬细胞对卵巢癌细胞SKOV3侵袭能力的影响。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测hCAP18/LL-37和versican V1蛋白的表达。采用干扰质粒抑制SKOV3细胞中versican V1的表达,分析巨噬细胞hCAP18/LL-37的表达及SKOV3细胞的侵袭能
【机 构】
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200065 上海,同济大学附属同济医院检验科,200065 上海,同济大学附属同济医院检验科,200065 上海,同济大学附属同济医院检验科,200065 上海,同济大学附属同济医院检验科,2000
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目的探讨抗菌肽hCAP18/LL-37在卵巢癌微环境中的作用及表达调控机制。
方法采用侵袭实验检测巨噬细胞对卵巢癌细胞SKOV3侵袭能力的影响。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测hCAP18/LL-37和versican V1蛋白的表达。采用干扰质粒抑制SKOV3细胞中versican V1的表达,分析巨噬细胞hCAP18/LL-37的表达及SKOV3细胞的侵袭能力。
结果共培养组(SKOV3细胞与巨噬细胞共培养)的侵袭穿膜数为(112.8±17.1)个,高于SKOV3培养组[SKOV3细胞单独培养,(8.2±1.9)个],差异有统计学意义(P<0.05)。hCAP18/LL-37中和抗体共培养组(SKOV3细胞、巨噬细胞和hCAP18/LL-37中和抗体共培养)的侵袭穿膜细胞数为(22.2±5.6)个,少于对照IgG共培养组[SKOV3细胞、巨噬细胞和对照IgG共培养,(100.6±25.2)个],差异有统计学意义(P<0.05)。与SKOV3细胞共培养后,巨噬细胞中hCAP18/LL-37蛋白和mRNA水平均升高,而在SKOV3细胞中无变化。与巨噬细胞共培养后,卵巢癌细胞中versican V1蛋白的表达和分泌均升高。干扰卵巢癌SKOV3细胞中versican V1的表达(SKOV3ver–/–细胞)后,巨噬细胞中hCAP18/LL-37蛋白和mRNA水平均低于对照细胞株(SKOV3ver+/+细胞);与巨噬细胞共培养后,SKOV3ver–/–细胞的穿膜细胞数[(24.8±4.6)个]低于SKOV3ver+/+细胞[(104.6±16.0)个],差异有统计学意义(P<0.05)。
结论卵巢癌微环境中,巨噬细胞表达分泌的抗菌肽hCAP18/LL-37促进卵巢癌细胞的侵袭,其表达受到肿瘤细胞分泌的versicanV1蛋白调控。
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