【摘 要】
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目的 建立大鼠后肾间充质细胞(MMC)的培养方法,为体外研究肾脏纤维化的发病机制和防治提供细胞技术平台.方法 采用胚胎后肾组织块接种培养法.通过相差显微镜观察培养的细胞形
【机 构】
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第三军医大学附属新桥医院肾内科全军肾脏病中心,解放军第一零七中心医院肾内科
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目的 建立大鼠后肾间充质细胞(MMC)的培养方法,为体外研究肾脏纤维化的发病机制和防治提供细胞技术平台.方法 采用胚胎后肾组织块接种培养法.通过相差显微镜观察培养的细胞形态.5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法及四唑盐比色(MTT)法测定细胞增殖.流式细胞术及细胞免疫化学染色法检测细胞表型标记蛋白以及成脂、成骨多向诱导分化等方法鉴定.结果 培养的细胞呈梭形成纤维细胞样,单个核,核质比大,增殖能力强.流式细胞术显示细胞不表达CD31、CD34、CD45,但明显表达CD29、CD166.细胞免疫化学结果显示该细胞不表达E-钙黏蛋白(E-cadherin),但明显表达波形蛋白(vimentin)和纤连蛋白(fibronectin).细胞可以传代至10代以上并且保持其间充质细胞表型,且在成脂及成骨诱导培养的条件下具有多向分化的能力.结论 原代培养的细胞为间充质细胞并且可以传代,具备较强的细胞增殖能力和表型稳定性,为后续实验提供了可靠资源.
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