HPV E7在人食管鳞癌细胞系EC9706中基因沉默的研究

• 作 者: 武双 刁明坤 李劲涛 刘洪伟 李凡 龚平 钟儒刚 曾毅
• 机 构: 100023 北京联合大学生物化学工程学院,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，传染病预防控制国家重点实验室,北京工业大学生命科学与生物工程学院 环境与病毒肿瘤学北京市重点实验室,中国疾病预防控制中
• 出 处: 中华实验和临床病毒学杂志
• 发表日期: 2015年29期
• 关键词: 乳头状瘤病毒 人 基因 食管肿瘤 细胞系

目的

探讨基因沉默人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)阳性食管鳞癌细胞系EC9706中E7基因后对细胞内基因表达的影响。

方法

使用RNAi专用逆转录病毒载体构建可干扰HPV18 E7基因的质粒，转入EC9706细胞系，筛选获得稳定表达干扰片段的细胞株。使用Real-time PCR和Western Blot对胞内相关基因和蛋白进行检测，并比较细胞活力差异。

结果

通过质粒构建与转染，获得了两株稳定表达干扰片段的细胞株EC9706R8-1及EC9706R8-4。Real-time PCR检测结果发现病毒基因E6、E7均被下调。Western Blot检测结果表明在病毒蛋白E7通路中控制细胞周期的p27蛋白表达量有显著的提高。同时，E6及E7基因下调后，细胞活力也明显下降。

结论

EC9706食管癌细胞系中HPV18 E7基因的沉默很可能与食管上皮细胞的癌变有关，该结果为HPV相关食管癌的基因沉默治疗研究提供了一定的理论基础