结核分枝杆菌重组Bb—MPT64疫苗的构建、鉴定及表达

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目的:构建和鉴定结核分枝杆菌重组双歧杆菌(Bifidobacteria bifidum,Bb)-MPT64疫苗。方法:以结核分枝杆菌H37Rv标准株基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到MPT64抗原编码基因序列,定向克隆入大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX—MPT64;用电穿孔法将该质粒导入Bb及BL21(DE3),构建结核分枝杆菌重组双歧杆菌-MPT64疫苗。用IPTG诱导重组BL21(DE3)菌表达MPT64/GST融合蛋白;SDS—PAGE及Western b
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