【摘 要】
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为获得有生物活性的犬表皮生长因子(cEGF),设计了4条引物,用SOE-PCR合成cEGF基因,将cEGF基因克隆至表达载体pET-24a,构建融合表达质粒,转化至E.coli BL21,IPTG诱导表达,对表
【基金项目】
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国家国际科技合作项目(2010DFB33920);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2013JB08)
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为获得有生物活性的犬表皮生长因子(cEGF),设计了4条引物,用SOE-PCR合成cEGF基因,将cEGF基因克隆至表达载体pET-24a,构建融合表达质粒,转化至E.coli BL21,IPTG诱导表达,对表达得到的重组蛋白进行纯化,MTT法测定重组蛋白的生物活性。结果显示,SOE-PCR合成得到的cEGF基因大小为156bp,编码52个氨基酸。大部分表达为包涵体,通过变性、纯化、复性的过程,每1L菌液得到重组犬rcEGF 16.1mg,经MTT法检测,rcEGF具有生物活性。结果表明,获得了具有生物活性的rcEGF。
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