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背景:目前分离干细胞的方法主要基于其细胞标志,近年来发展一种非基于细胞标志的干细胞分离方法,即利用荧光激活细胞分类法将组织中干细胞和成熟细胞分离。目的:分离新生小鼠小肠黏膜来源的侧群细胞,探讨利用荧光活化细胞分选系统构建鼠肠干细胞群的可行性。方法:取新生小鼠小肠全长,制作小肠黏膜的类器官片段并制备成单细胞悬液。使用Hoechst33342和碘化丙啶染色后用流式细胞仪分选侧群细胞。提取细胞总RNA和蛋白,RT-PCR及Western-blot方法分别检测其中MSI-1 mRNA及MSI-1蛋白的表达水平。结