【摘 要】
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【目的】探究酶液制备及测定条件对真菌粗酶制剂脱氢酶活性的影响,确定真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定方法。【方法】采用氯化三苯基四氮唑(TTC)还原法测定真菌粗酶制剂的脱氢酶
【出 处】
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西北农林科技大学学报(自然科学版)
【基金项目】
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陕西博秦生物工程有限公司微生物增油项目
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【目的】探究酶液制备及测定条件对真菌粗酶制剂脱氢酶活性的影响,确定真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定方法。【方法】采用氯化三苯基四氮唑(TTC)还原法测定真菌粗酶制剂的脱氢酶活性,分析粗酶制剂与去离子水质量比、活化时间、活化温度、振荡速率、搅拌时间、固液分离方法、活化剂种类、过滤介质及显色时间对脱氢酶活性的影响。【结果】1真菌粗酶制剂活化、分离方式及显色时间对真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定有明显影响。2确定真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定优化方法为:将粗酶制剂与去离子水按照质量比1∶40装入三角瓶,在28℃、120r/min恒温摇床中振荡15h,用快速滤纸过滤获得酶液;将酶液与TTC-葡萄糖溶液混匀,在40℃恒温水浴锅中反应显色,待反应液出现红色后计时,维持90min完成显色反应,取出后加乙酸乙酯充分摇匀,4℃冰箱中静置5~6h,取上层澄清有机相在波长485nm比色,根据标准曲线计算脱氢酶活性。【结论】获得了测定真菌粗酶制剂脱氢酶活性的测定方法。
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