无机磷酸盐对耐热碱性磷酸酶耐热性的影响

• 作 者: 白晓阳 毛裕毛 等
• 机 构: 复旦大学生命科学学院遗传学研究所
• 出 处: 中国生物化学与分子生物学报
• 发表日期: 2001年4期
• 关键词: 耐热碱性磷酸酶 磷酸盐 热稳定性 thermostability alkaline phosphatase phosphate
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (No .39870 40 2 )&&

为研究体外磷酸根离子对嗜热菌（Thermus sp.3041)碱性磷酸酶TAPND27耐热性的影响，通过克隆子于高质粒上编码TAPND27的基因在E.coli中的诱导表达和蛋白产物的纯化，获得了电泳纯的TAPND27，耐热性表明磷酸根离子能显著提高酶的热稳定性，在10mmol/L磷酸离子存在下，TAPND27的Tm值从91℃上升到97℃，酶的动力学实验证实无机磷酸盐（Pi)对TAP－ND27的酶活笥有可逆竞争性抑制作用，Ki值为0.99×10^-4mol/L,上述结果说明，TAPND27耐热性的