【摘 要】
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目的:探讨环状RNA hsa_circ_0066336(circFLNB)在骨髓源性细胞中的表达,并分析其潜在功能.方法:选择骨髓源性细胞THP-1和Jurket作为模式细胞,通过设计背对背引物获得circRNA,分析circRNA在2种模式细胞中表达的差异.采用T-A克隆手段构建质粒,进行测序、比对.用Arraystar软件预测hsa_circ_0066336的靶标miRNA.从THP-1细胞中提取靶标miRNA后反转录,再以Real-time PCR检测.结果:①在THP-1和Jurket细胞中成功扩
【机 构】
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中国医科大学生命科学学院发育细胞生物教研室,沈阳 110000
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目的:探讨环状RNA hsa_circ_0066336(circFLNB)在骨髓源性细胞中的表达,并分析其潜在功能.方法:选择骨髓源性细胞THP-1和Jurket作为模式细胞,通过设计背对背引物获得circRNA,分析circRNA在2种模式细胞中表达的差异.采用T-A克隆手段构建质粒,进行测序、比对.用Arraystar软件预测hsa_circ_0066336的靶标miRNA.从THP-1细胞中提取靶标miRNA后反转录,再以Real-time PCR检测.结果:①在THP-1和Jurket细胞中成功扩增出circFLNB,结果显示其表达在2种模式细胞中没有统计学差异(P=0.105).②克隆出含有hsa_circ_0066336的质粒,测序比对后找到了反向环状剪切位点.③通过Arraystar软件预测了 hsa_circ_0066336靶向的5个miRNA,并检测到靶标miRNA的表达.结论:CircFLNB是表达在骨髓源性细胞中的一个环状RNA,通过对其下游靶向miRNA功能的了解,推断circFLNB可能会参与多种疾病的发生.
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