Reg3β干扰载体的构建及在H9C2心肌细胞中的鉴定

• 作 者: 易波 蔡玉立 李俊峰 包艳 陈小琳 文重远
• 机 构: 武汉大学人民医院内分泌科
• 出 处: 医学研究杂志
• 发表日期: 2020年8期
• 关键词: Reg3β 基因短发夹 RNA载体构建H9C2 心肌细胞 Reg3βgeneshRNAVector constructionH9C2 cells
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目(81900749),中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2042017kfDI33),湖北省自然科学基金资助项目(2018CFBI50)

目的构建再生基因蛋白3β(regenerating islet-derived protein 3 beta,Reg3β)干扰载体,并在H9C2大鼠心肌细胞中优化转染条件,鉴定抑制效果,为深入探索Reg3β在心血管疾病的作用提供有利的工具。方法设计合成Reg3β干扰序列,在5'端加入一个Sac 1的酶切位点,3'端加人L0OP环序列和反向互补序列,构建pG1.2-Reg3βshRNA沉默载体。接着分别用Li-pofectamine2000和Lipofectamine3000优化摸索转染大鼠