【摘 要】
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为构建表达增强型绿色荧光蛋白（eGFP）融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体。利用Sf-9细胞表达eGFP,用PCR法从重组Bacmid和pEGFP-C3质粒中扩增gp64SP、eGFP和VSVGED片段,利用一步法S
【机 构】
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微生物黑龙江省高校重点实验室/黑龙江大学生命科学学院
【基金项目】
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黑龙江大学高层次人才（创新团队）支持计划“功能微生物及其产物应用”（Hdtd2010-17）
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为构建表达增强型绿色荧光蛋白（eGFP）融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体。利用Sf-9细胞表达eGFP,用PCR法从重组Bacmid和pEGFP-C3质粒中扩增gp64SP、eGFP和VSVGED片段,利用一步法SOE-PCR将3个片段连接在一起。用XbaI和HindIII酶切融合片段与pFastBacPH,连接获得阳性质粒命名为pFB/LM-PH。转化E.coliDH10Bac,通过转座子Tn7的介导,获得重组杆状病毒Bv-LM-PH,感染Sf9昆虫细胞。结果表明：通过倒置荧光显微镜观察细胞形态及荧光表达
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