滇水金凤花距发育相关基因TIP的克隆及表达分析

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摘要:本文通过对滇水金凤(Impatiensuliginosa)花距发育相关基因TIP的克隆与表达分析,探讨其对滇水金凤花距发育的分子机理。本研究运用RT-PCR技术成功克隆了滇水金凤花距发育相关基因TIP的3个片段,其cDNA 全长为777、762和750 bp, 分别编码258、253和249 aa, 命名为IuTIP1-1、IuTIP1-2和IuTIP2-1, 其蛋白均具有MIP (major intrinsic protein)超家族典型的2个NPA (Asn-Pro-A1a)保守结构域。同源性分析表明, 滇水金凤TIP基因的氨基酸序列与雷蒙德氏棉(XP_012440576.1)、橡胶树(XP_021686336.1)同源性达77.95%左右; 系统进化分析表明, IuTIP1-1与IuTIP1-2聚为一大支, IuTIP2-1单独成一支, 三者为旁系同源关系。qRT-PCR分析表明, 3个基因在滇水金凤花距发育的3个时期及2个不同部位均有表达, 其中IuTIP1-1在花苞期檐部的表达量最高, 其次是IuTIP2-1在盛花期檐部表达量最高, 随着花距的发育, 两者在花距距部的表达逐渐下调; 而IuTIP1-2在花距檐部的表达随花距发育逐渐下调, 但在花距距部的表达逐渐上升, 盛花期达到最高, 可能与IuTIP1-2对花距距部发育起主要作用有关。根据以上结果, 推测滇水金凤的3个TIP基因为旁系同源关系, IuTIP1-1和IuTIP2-1对花距檐部发育起主要作用, 而IuTIP1-2对花距距部发育起主要作用。
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