【摘 要】
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以百山祖冷杉DNA为材料,分析了DNA浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶的含量以及退火温度对ISSR-PCR扩增结果的影响,经过优化实验建立了百山祖冷杉ISSR-PCR最佳反应体系.25μL
【机 构】
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浙江大学,浙江大学,百山祖自然保护区,温州师范学院
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以百山祖冷杉DNA为材料,分析了DNA浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶的含量以及退火温度对ISSR-PCR扩增结果的影响,经过优化实验建立了百山祖冷杉ISSR-PCR最佳反应体系.25μL的PCR反应液含有的组分和终浓度分别为:约40 ng模板DNA,1.2 U Taq酶,0.4 μmol/L引物,1.5mmol/L MgCl2,0.2mmol/L dNTPs,2%去离子甲酰胺.利用优化反应体系从100个ISSR引物中,筛选出了13个稳定性高、重复性好的引物,对40个百山祖冷杉个体材料的DNA进
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