人心肌肌钙蛋白T单克隆抗体的研制及鉴定

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhengzheng369
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以人心肌肌钙蛋白T(cTnT)为抗原,采用脾内免疫法,免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠Sp2/0细胞融合,经间接ELISA法筛选,三次克隆化后获得5株能稳定分泌抗cTnT单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞G3、G8、G10、A5和A7。免疫球蛋白亚类鉴定其中1株为IgG2a,4株为IgM。染色体数目92~110条。将G3、G8、G10、A5的单克隆抗体腹水做1:100稀释与LDH、CK、CKMB和GOT等心肌酶均无交叉反应。5株McAb的腹水效价为3.2×10-6~1.6×10-7。McAb相加试验表明,A5和G3可识别不同的抗原表位。 BALB / c mice were immunized with cTnT as antigen and spleen lymphocytes were fused with mouse Sp2 / 0 cells by indirect immunosorbent assay. After three clones Five hybridoma cells G3, G8, G10, A5 and A7 that can stably secrete anti-cTnT monoclonal antibody (McAb) were obtained. Immunoglobulin subclass identification of which one is IgG2a, 4 strains of IgM. Chromosome number 92 ~ 110. The G3, G8, G10, A5 monoclonal antibody ascites do 1: 100 dilution and LDH, CK, CKMB and GOT and other myocardial enzymes did not cross-react. The ascites titer of 5 McAbs was 3.2 × 10-6 ~ 1.6 × 10-7. McAb addition experiments show that A5 and G3 can recognize different epitopes.
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