【摘 要】
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目的:探讨乙型肝炎病毒X(HBVX)基因及其产物对肝细胞凋亡相关基因表达的影响.方法:将实验用SPF级成年♂KM小鼠分为实验组、空质粒对照组、生理盐水对照组.实验组以构建好的PC
【机 构】
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福建医科大学附属协和医院消化内科,福建省,福州市,350001
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目的:探讨乙型肝炎病毒X(HBVX)基因及其产物对肝细胞凋亡相关基因表达的影响.方法:将实验用SPF级成年♂KM小鼠分为实验组、空质粒对照组、生理盐水对照组.实验组以构建好的PCDNA3.1-HBVX质粒,空质粒对照组以PCDNA3.1质粒,生理盐水对照组以生理盐水,通过尾静脉高压注入动物体内,在第48小时处死小鼠后,取肝组织,以RT-PCR,凝胶回收测序及Western blot检测HBVX表达,以RT-PCR半定量检测小鼠肝组织内bax、c-myc及bcl-2的表达.结果:实验组RT-PCR显示465 bp处有清楚条带,肝组织内有HBVX mRNA的存在,两对照组无HBVX mRNA存在,Western blo检测实验组有HBVX蛋白的表达;两对照组则无HBVX蛋白表达.通过对小鼠肝组织凋亡相关因子的半定量RT-PCR,相对于空质粒对照组和生理盐水对照组,转染HBVX基因的小鼠肝组织bax、c-myc及bcl-2的mRNA相对表达量明显增高,差异有显著性意义(bax:1.3127±0.0900vs 1.0023±0.1670,0.9094±0.1081;c-myc:1.6294±0.0672 vs 1.2869±0.0880,0.9757±0.0397;bcl-2:1.5567±0.1257 vs 0.6856±0.1554,0.5488±0.1278,均P<0.05).结论:成功建立了表达HBVX的小鼠动物模型,并证明转染HBVX基因后小鼠肝脏组织内bax、bcl-2及c-myc的mRNA表达同时上调.
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