【摘 要】
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目的 应用RNA干扰技术构建一个载体同时编码四个基因,即血管内皮生长因子（VEGF）、致癌基因蛋白（c-myc）、存活素（survivin）和端粒酶反转录酶的短发夹重组质粒,并与单基因质粒做对比,通过体内外实验,研究其对鼻咽癌细胞CNE-2Z生长增殖的影响.方法 构建同时表达VEGF、c-myc、survivin和端粒酶反转录酶并含荧光素标记的短发夹RNA质粒命名为P-1,并构建单独表达VEGF、
【机 构】
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郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科,450052,郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科,450052,郑州市管城区疾病预防控制中心
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目的 应用RNA干扰技术构建一个载体同时编码四个基因,即血管内皮生长因子（VEGF）、致癌基因蛋白（c-myc）、存活素（survivin）和端粒酶反转录酶的短发夹重组质粒,并与单基因质粒做对比,通过体内外实验,研究其对鼻咽癌细胞CNE-2Z生长增殖的影响.方法 构建同时表达VEGF、c-myc、survivin和端粒酶反转录酶并含荧光素标记的短发夹RNA质粒命名为P-1,并构建单独表达VEGF、c-myc、survivin和端粒酶反转录酶的质粒,分别命名为P-2、P-3、P-4和P-5,分别将其将转染人鼻咽癌CNE-2Z细胞株及荷瘤裸鼠瘤体内.以激光共聚焦显微镜观察质粒在CNE-2Z细胞及瘤体内的转染及表达情况.四甲基偶氮噻唑蓝法检测细胞增殖活性,实时PCR在mRNA水平上检测对目的基因表达的抑制作用,免疫印迹法在蛋白水平上检测对目的基因的封闭效果,Trans well侵袭小室模型观察导入CNE-2Z细胞对其恶性生物学行为的改变,流式细胞仪观察各组凋亡率,体内裸鼠成瘤实验观察质粒对肿瘤的抑制效果.结果 多基因干扰质粒转染鼻咽癌细胞后,CNE-2Z细胞增殖受到明显抑制,体外侵袭能力显著下降（P值均＜0.05）.实时PCR证实多基因组4个不同基因mRNA表达均降低,免疫印迹技术验证目的基因蛋白同时表达下调.流式细胞仪结果证明多基因凋亡率明显高于单基因组（P值均＜0.05）.体内抑瘤实验表明,与阴性组和空白组相比,P-1组移植瘤生长明显受到抑制（P＜0.05）,并且多基因质粒抑制肿瘤细胞增长的作用要强于单基因干扰质粒（户值均＜0.05）.结论 同时干扰多个基因能有效抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导其凋亡,为鼻咽癌基因治疗奠定了良好的实验基础.
其他文献
目的研究黏膜接触点头痛与鼻解剖变异的相关性。方法对58例黏膜接触点头痛患者鼻窦CT及鼻内镜检查进行鼻解剖结构评估及骨间隙值测定，同时对药物治疗2个月无效的患者采取内镜下鼻异常解剖干预，并分析疗效。结果58例中，老年患者25例、中青年患者33例，两者钩突与筛泡变异差异有统计学意义（P<0.05），鼻中隔高位偏曲、中鼻甲及上鼻甲变异差异无统计学意义（P>0.05），钩突内缘与中鼻甲外壁间距、钩突上缘与
【摘要】中共十八届三中全会审议通过了《中共中央关于全面深化改革若干重大问题的决定》（以下简称《决定》）。《决定》的关键词是改革，对于教育改革做了全面详尽的安排。江西高等教育内涵建设亟待发展。那么本文就来探讨十八届三中全会决定对江西高等教育内涵建设的影响，发现对大学文化和创新人才培养方式的影响深远。 【关键词】十八届三中全会决定；高等教育；内涵建设 中图分类号：G60文献标识码：A文章编号：10
错构瘤（hamartoma）是指由一种或多种分化成熟的组织成分构成,结构紊乱,呈局限生长的特殊畸形,多见于肺、肾及下丘脑,咽部错构瘤极为少见,现报道如下.患儿女,出生后9 h.2009年9月15日以生后呼吸困难9 h为主诉收入中国医科大学附属盛京医院新生儿科.该患儿为39周足月剖宫产,羊水、胎盘、脐带正常,生后逐渐出现呼吸困难,口唇发绀,鼻翼扇动,吸气时胸骨上窝凹陷,侧卧位时可缓解.
患者女，47岁。于2年前无意间触及额部正中有一肿物，无疼痛感，约黄豆粒大小，当时未就诊，于2009年2月发现肿物明显增大遂来就诊。既往身体健康，无外伤及手术史。体格检查：额部正中近额骨鼻突处可见局限性隆起，表面皮肤无红肿及瘘管形成，触之无疼痛感，质韧，与皮肤不粘连，活动度不大肿物，约1.5cm×1.5cm×1.5cm大小。未进行其他检查。门诊诊断为额部肿物，给予门诊局麻下行手术切除术，术中见肿物位
误诊，不仅在临床实践中频频发生，即使在查阅医学文献时它也经常不失时机地跃入眼帘。这个古老而难缠的问题，原本是羁绊医生在科学探索道路上艰难前行的绞索，而如今又增添了新的功能，演变成为促使患者追究医疗法律责任时浅显易懂的缘由。
【摘要】感恩是中华民族的传统美德，增强学生的感恩意识，开展感恩教育是高校德育的重要一环。作为高校的教育主体，在解决贫困生经济困难的同时，应该重视培养他们的感恩意识，加强感恩教育。 【关键词】贫困生；感恩；感恩教育 中图分类号：G64文献标识码：A文章编号：1006-0278（2016）01-238-01 一、高职院校贫困生感恩现状及原因分析 （一）感恩现状 中华民族是一个拥有优良感恩传统
目的 探讨现代精确的放射治疗对鼻咽血管纤维瘤术后残余的疗效.方法 对4例较大鼻咽血管纤维瘤患者术后残余的病变、影像学资料、放疗效果及健康情况等进行回顾和评估.结果 4例患者均因肿瘤向颅内外扩展未能全切,补作伽玛刀或三维适形放疗33.9～40.0 Gy剂量.随访1.5～7.0年,影像学资料提示4例颅内病变均已缩小或消失,其中1例颅外有肿瘤复发经再次手术治愈.结论 侵入颅内无法全切又不宜再次手术的肿瘤
鼻出血是耳鼻咽喉科急症之一,而老年人鼻出血,往往经多次填塞止血,鼻腔黏膜已广泛擦伤、糜烂,尤其是合并有高血压、动脉硬化、糖尿病,或伴有严重的鼻中隔偏曲等疾病的高龄患者,处理时更为棘手.如何做到有效的鼻腔填塞止血,减少因填塞带来的痛苦,一直是临床工作所面临的问题.2001年12月至2009年8月,我们在鼻内镜下对78例老年鼻出血患者,先应用低温等离子凝固出血部位,再应用高膨胀止血海绵填塞,取得良好治
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由中华医学会、中华医学会耳鼻咽喉头颈外科学分会主办的中华医学会2010全国耳鼻咽喉头颈外科中青年学术会议拟于2010年5月26—28日在上海市（上海光大会展中心国际大酒店）举行。