【摘 要】
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目的构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3-NS4全长基因重组质粒并诱导表达,鉴定NS3-NS4蛋白的抗原性.方法应用PCR技术从pUC19/HCV中扩增目的基因,构建重组表达质粒,进行原核
【机 构】
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新乡医学院第一附属医院肿瘤科,西安交通大学免疫学教研室,西安华广生物工程有限公司
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目的构建丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3-NS4全长基因重组质粒并诱导表达,鉴定NS3-NS4蛋白的抗原性.方法应用PCR技术从pUC19/HCV中扩增目的基因,构建重组表达质粒,进行原核表达,用SDS-PAGE、ELISA技术对表达产物的抗原性进行鉴定.结果成功构建、表达了重组质粒pBV220/NS3-NS4,用50份质控标准血清对表达蛋白质进行抗原性检测,与第二代诊断试剂相比,总符合率为96%.结论全长NS3-NS4蛋白是一个优势免疫原性区,应该是HCV EIA诊断试剂的有效成分.
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