【摘 要】
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目的:研究circPVT1对胃癌细胞5-氟尿嘧啶(FU)敏感性的作用及分子机制.方法:采用RT-PCR检测胃癌组织、胃癌细胞BGC823和5-FU抵抗胃癌细胞BGC823/5-FU中circPVT1的相对表达水平.沉默circPVT1,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性,观察其对细胞活性的影响.采用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力.采用TUNEL试剂盒和流式细胞仪检测细胞凋亡情况.采用RT-PCR和Western印迹检测Bcl-2、Bax和caspase-3基因mRNA和蛋白的表达水平.沉默circPVT1
【机 构】
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河南省人民医院药学部,郑州大学人民医院药学部,郑州450003;郑州大学药学院,郑州450000
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目的:研究circPVT1对胃癌细胞5-氟尿嘧啶(FU)敏感性的作用及分子机制.方法:采用RT-PCR检测胃癌组织、胃癌细胞BGC823和5-FU抵抗胃癌细胞BGC823/5-FU中circPVT1的相对表达水平.沉默circPVT1,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性,观察其对细胞活性的影响.采用克隆形成实验检测细胞克隆形成能力.采用TUNEL试剂盒和流式细胞仪检测细胞凋亡情况.采用RT-PCR和Western印迹检测Bcl-2、Bax和caspase-3基因mRNA和蛋白的表达水平.沉默circPVT1观察裸鼠皮下移植瘤生长.结果:在5-FU抵抗患者胃癌组织中circPVT1的表达水平明显高于5-FU敏感患者(P<0.01).与BGC823细胞相比,circPVT1在BGC823/5-FU细胞中的表达水平明显升高(P<0.001).下调circPVT1表达可增强5-FU的细胞毒性(P<0.05).与5-FU+si-NC组相比,5-FU+si-circPVT1组BGC823/5-FU细胞的克隆形成能力明显降低(P<0.05).5-FU+si-circPVT1组BGC823/5-FU细胞的凋亡数目明显高于5-FU+si-NC组(P<0.01).沉默circPVT1,与5-FU+si-NC组相比,5-FU+si-circPVT1组BGC823/5-FU细胞中Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平明显降低,Bax和caspase-3的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01).裸鼠移植瘤实验结果显示,5-FU+si-circPVT1组移植瘤体积和重量明显低于5-FU+si-NC组(P<0.05).结论:沉默circPVT1可以通过调控Bcl-2、Bax和caspase-3的表达,增强BGC823/5-FU细胞对5-FU的敏感性.
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