人鼠共打靶ERβ特异性基因沉默载体的构建和鉴定

来源 :长治医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ringogogo
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目的:构建人和鼠共打靶特异性ERβ基因沉默慢病毒载体。方法:检索人和小鼠ERβ基因转录本及其序列,应用SiRNA Target Finder软件设计人和小鼠共打靶ERβ基因沉默siRNA和阴性对照siRNA,合成发夹状双链shRNA,与线性化质粒PLL3.7连接构建为重组质粒(ERβ-shRNA-PLL3.7和阴性对照质粒ER-N-shRNA-PLL3.7),经鉴定后,转染人成骨肉瘤细胞MG63和小鼠成骨细胞株MC3T3-E1,经Realtime-PCR和western blot法检测重组质粒对目的基因沉
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