【摘 要】
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目的:研究miR-4739对胃癌NCI-N87细胞恶性生长和转移的影响及其机制.方法:采用qRT-PCR检测胃黏膜上皮GES-1细胞和胃癌HGC-27、NCI-N87、HS-746T细胞中miR-4739表达水平.在胃癌NCI-N87细胞中转染miR-4739 mimics后,采用CCK-8检测细胞增殖、流式细胞术检测凋亡、Transwell小室检测迁移和侵袭、蛋白质印迹法检测剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-caspase-3)、波形蛋白(Vimentin)和上皮性钙黏附素(E-cadheri
【机 构】
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陕西省人民医院急诊外科,西安 710068
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目的:研究miR-4739对胃癌NCI-N87细胞恶性生长和转移的影响及其机制.方法:采用qRT-PCR检测胃黏膜上皮GES-1细胞和胃癌HGC-27、NCI-N87、HS-746T细胞中miR-4739表达水平.在胃癌NCI-N87细胞中转染miR-4739 mimics后,采用CCK-8检测细胞增殖、流式细胞术检测凋亡、Transwell小室检测迁移和侵袭、蛋白质印迹法检测剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(C-caspase-3)、波形蛋白(Vimentin)和上皮性钙黏附素(E-cadherin)的表达.采用在线靶基因预测软件预测miR-4739的靶基因,随后采用荧光素酶报告系统鉴定二者的靶向关系.在胃癌NCI-N87细胞共转染miR-4739 mimics和迁移侵袭增强因子1(MIEN1)过表达载体pcDNA-MIEN1后,检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力以及C-caspase-3、Vimentin和E-cadherin表达情况.结果:胃癌HGC-27、NCI-N87、HS-746T细胞中miR-4739表达水平均低于胃黏膜上皮GES-1细胞,差异均有统计学意义(P<0.05).胃癌NCI-N87细胞转染miR-4739 mimics后,与转染miR-mimics-NC相比,细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,细胞凋亡率升高,E-cadherin、C-caspase-3蛋白表达水平升高,Vimentin蛋白表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05).miR-4739可靶向抑制MIEN1表达.胃癌NCI-N87细胞共转染miR-4739 mimics和pcDNA-MIEN1后,与共转染miR-4739 mimics和pcDNA相比,细胞增殖、迁移、侵袭能力升高,细胞凋亡率降低,E-cadherin、C-caspase-3蛋白表达水平减少,Vimentin蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:MiR-4739可通过靶向抑制MIEN1表达阻碍胃癌NCI-N87细胞的恶性生长和转移潜能.
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