蓝光诱导氧化应激反应参与视网膜色素上皮细胞凋亡机制研究

• 作 者: 俞永珍 徐哲 邹秀兰 张楚 王观峰 邹玉平
• 机 构: 广州军区广州总医院眼科,广州中医药大学,广州医科大学附属第三医院
• 出 处: 眼科新进展
• 发表日期: 2015年06期
• 关键词: 凋亡 活性氧 氧化应激 人视网膜色素上皮细胞
• 基金项目: 广东省科技计划项目(编号:2011B031800202);广东省科学自然基金项目(编号:S2013010012045)~~

目的研究氧化应激反应参与蓝光诱导体外培养的人视网膜色素上皮细胞(human retinal pigment epithelium,hR PE)凋亡的作用机制及其与时间的关系。方法用LED蓝光光源建立蓝光损伤体外培养的hR PE细胞模型,蓝光辐射强度为(4.0±0.5)mW·cm-2,并将细胞分为光照时间0 h(正常对照组)、0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h、12 h组。透射电镜观察细胞的超微结构,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞内活性氧水平,Western Blot技术检测Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达情况。结果各光照组细胞均有不同程度的胞浆减少、空泡状改变、线粒体肿胀、微绒毛减少或脱落。正常对照组、光照1 h、2 h、3h、4 h、5 h、6 h、12 h的细胞凋亡率分别为(5.30±0.64)%、(5.90±0.89)%、(6.80±0.98)%、(7.70±0.76)%、(9.60±1.10)%、(11.45±2.60)%、(14.90±1.60)%及(23.90±1.20)%,与正常对照组比较,光照4 h后细胞凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。正常对照组、0.5 h、1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h组hR PE细胞生成的ROS相对量分别为(12.90±1.18)%、(20.09±0.63)%、(23.91±1.47)%、(29.14±1.94)%、(34.30±1.84)%、(38.97±1.68)%、(44.08±0.83)%、(57.76±2.80)%,光照0.5 h后细胞产生的ROS明显升高,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Caspase-3及Bax在3 h后轻微上调,而5~6 h后表达上调较明显,Bcl-2的表达则在3 h后下调明显,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论蓝光可通过产生的氧化应激反应激活细胞凋亡系统导致细胞损伤,光照持续3 h时细胞可能出现了损伤但不明显,光照5~6 h后出现了较为明显的细胞凋亡。