【摘 要】
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以温敏性材料N-羟基琥珀酰亚胺活化的聚(N-异丙基丙烯酰胺)为载体制备固定化木瓜蛋白酶,对其酶学性质进行了研究.结果表明:固定化酶的最适pH值为7.5,最适温度为65 ℃,米氏常
【机 构】
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浙江工业大学药学院,浙江杭州,310032;杭州博林生物技术有限公司,浙江杭州,310018
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以温敏性材料N-羟基琥珀酰亚胺活化的聚(N-异丙基丙烯酰胺)为载体制备固定化木瓜蛋白酶,对其酶学性质进行了研究.结果表明:固定化酶的最适pH值为7.5,最适温度为65 ℃,米氏常数为2.72 mg/mL;经过24次温敏循环操作,剩余相对活力86.6%;在4℃条件下放置60d,剩余相对活力为71.5%.与游离酶相比,固定化酶pH值稳定性、热稳定性、操作稳定性和储存稳定性都有显著提高.将此固定化酶应用于HCG单克隆抗体消化,与纤维素固定化酶相比,水解能力更强,更适合于大分子的酶解,特别是抗体片段的制备.
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