两种尿激酶原变体(Ala~(175)→Ser,Tyr~(187)→His,Lys~(300)→His和Ala~(175)→Ser,Tyr~(187)→His)的构建及性质研究

• 作 者: 史蔚 朱慧
• 机 构: 南京大学生物化学系南京大学医药生物技术国家重点实验室,南京大学生物化学系南京大学医药生物技术国家重点实
• 出 处: 南京大学学报：自然科学版
• 发表日期: 2000年2期
• 关键词: 尿激酶原 定点突变 内在酶活性 血栓 药物疗物

利用定点突变方法，构建了尿激原变体基因ｍｕｋ１（Ａｌａ＾１７５→Ｓｅｒ，Ｔｙｒ＾１８７→Ｈｉｓ，Ｌｙｓ＾３００→Ｈｉｓ）及ｍｕｋ２（Ａｌａ＾１７５→Ｓｅｒ，Ｔｙｒ＾１８７→Ｈｉｓ）。两种尿激酶原变体在大肠杆菌ＢＬ２１中表达得到包涵体，经体外变复性，ＳＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换柱层析，Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ吸附除支双链尿激酶，得到的蛋白均为银染一条带。用人工合成的发色底物Ｓ２