【摘 要】
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目的 探索先天性心脏病相关基因钙调磷酸酶调节蛋白1基因(RCAN1)两个亚型(RCAN1-1和RCAN1-4)组织特异性表达的机制.方法 通过生物信息学预测RCAN1-1和RCAN1-4各自启动子区的
【机 构】
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武汉科技大学附属武汉亚洲心脏病医院 心外科 职业危害识别与控制湖北省重点实验室,湖北 武汉430022
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目的 探索先天性心脏病相关基因钙调磷酸酶调节蛋白1基因(RCAN1)两个亚型(RCAN1-1和RCAN1-4)组织特异性表达的机制.方法 通过生物信息学预测RCAN1-1和RCAN1-4各自启动子区的转录因子结合位点,分析比对并筛选出具有差异的位点,通过定点突变及荧光素酶报告基因系统检测筛选出的位点活性.将鉴定的转录因子的抑制剂与RCAN1表达载体作用,分为实验组(抑制剂+)和对照组(抑制剂-),通过实时荧光定量PCR检测RCAN1亚型mRNA的表达量.结果 在RCAN1-1启动子区-138GCCCGCCGCC-129处检测出一个新的、未报道过的具有活性的转录因子Sp1结合位点.实验组RCAN1-1 mRNA表达量低于对照组(P<0.001),而两组RCAN1-4 mRNA的表达量无差异.结论 Sp1特异性调控RCAN1-1的转录,增强其表达,而对RCAN1-4无影响,提示其可作为将来基因治疗或检测的一个潜在靶点.
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