【摘 要】
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目的以食管癌细胞株Eca109为实验材料,采用无血清法培养出球样细胞,在体外大量繁殖,运用多种方法鉴定其干细胞特性,为研究食管癌创造条件。方法在含10%小牛血清的细胞培养液
【机 构】
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中山市人民医院重症医学科,佛山市南海区第八人民医院外一科
【基金项目】
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2015年中山市科技计划项目(2015B1090),2015年广东省医学科研基金(A2015516).
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目的以食管癌细胞株Eca109为实验材料,采用无血清法培养出球样细胞,在体外大量繁殖,运用多种方法鉴定其干细胞特性,为研究食管癌创造条件。方法在含10%小牛血清的细胞培养液中培养食管癌细胞株Eca109,传2~3代,后逐步降低细胞培养液中小牛血清的浓度,直至无血清,1周后收集悬浮生长的球样细胞,采用流式细胞仪分析细胞周期;免疫荧光法检测干细胞标记物亮氨酸丰富重复G蛋白偶联受体5重组蛋白(Lgr5)的表达;裸鼠致瘤实验检验球样细胞体内成瘤情况。结果Eca109细胞在无血清培养液中培养1周,在上清液中收集少量
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