牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作 者: 李昂 徐红艳 石建峰 朱春晖 饶国洲 苟建重
• 机 构: 西安交通大学医学院附属口腔医院口腔医学研究中心,西安交通大学医学院附属口腔医院牙周科
• 出 处: 华西口腔医学杂志
• 发表日期: 2011年2期
• 关键词: 牙龈卟啉单胞菌 3-磷酸甘油醛脱氢酶 原核表达 Porphyromonas gingivalis glyceraldehydes 3-phosphate de

目的克隆牙龈卟啉单胞菌外膜蛋白3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）,并将其置于大肠杆菌中作融合表达。方法利用PCR技术,克隆GAPDH,插入克隆载体pMD18-T中得到克隆重组子pMD18-T-GAPDH。克隆重组子与表达载体pET-32a双酶切后连接构建表达质粒pET-32a-GAPDH。重组原核表达质粒经酶切鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,以不同浓度异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达融合蛋白。结果核酸序列测定与分析表明：表达重组子pET-32a-GAPDH与NCBI核酸数据库中收录的