葡萄目标起始密码子多态性反应体系的优化

• 作 者: 张君玉 郭大龙 龚莹 刘崇怀 李猛 张国海
• 机 构: 河南科技大学林学院,中国农业科学院郑州果树研究所
• 出 处: 果树学报
• 发表日期: 2011年2期
• 关键词: 葡萄 SCoT 正交设计 单因素试验 体系优化 Grape（Vitis vinifera） SCoT Orthogonal design Single fact
• 基金项目: 国家自然科学基金（NSFC：30800742）, 河南省教育厅自然科学研究计划（2009B210003）, 国家葡萄产业技术体系（nycytx-30-zy-01）

SCoT标记是一种新型目的基因分子标记方法,采用L16（45）正交试验和单因素试验2种方法优化了葡萄SCoT-PCR反应体系,结果表明正交试验中关键影响因子为dNTPs浓度,单因素试验中为dNTPs和Mg2＋浓度。综合2种方法,优化的葡萄SCoT-PCR反应体系为：Mg2＋2.0 mmol·L^-1、dNTPs 0.3 mmol·L^-1、Taq酶1.0 U、引物0.3μmol·L^-1、DNA模板30 ng,总体积20μL。扩增程序为：94℃预变性5 min;94℃变性1