【摘 要】
：
目的 研究士的宁对人肝细胞HL-7702中葡萄糖醛酸转移酶1A4(UGT1A4)表达的影响及其与孕烷X受体(PXR)/组成型雄烷受体(CAR)调控通路的关系,明确UGT1A4与士的宁的关系及作用机制,为进一步研究士的宁代谢及合成或改造相似结构药物提供一定的实验依据.方法 以人肝细胞株HL-7702为研究对象,不同浓度的士的宁(10、20、40 pmol·L-1)干预24 h后,RT-qPCR和Western Blot法检测士的宁对HL-7702细胞中UGT1A4、PXR和CAR mRNA和蛋白表达水平的影
【机 构】
：
广州医科大学附属中医医院,广东广州510130
论文部分内容阅读
目的 研究士的宁对人肝细胞HL-7702中葡萄糖醛酸转移酶1A4(UGT1A4)表达的影响及其与孕烷X受体(PXR)/组成型雄烷受体(CAR)调控通路的关系,明确UGT1A4与士的宁的关系及作用机制,为进一步研究士的宁代谢及合成或改造相似结构药物提供一定的实验依据.方法 以人肝细胞株HL-7702为研究对象,不同浓度的士的宁(10、20、40 pmol·L-1)干预24 h后,RT-qPCR和Western Blot法检测士的宁对HL-7702细胞中UGT1A4、PXR和CAR mRNA和蛋白表达水平的影响.通过双荧光素酶报告基因法以及脂质体瞬时转染方法,分析UGT1A4报告基因(来自于瞬时共转染hCAR或者是hPXR之后的HL-7702细胞)的活性在各浓度士的宁(10、20、40 pmol·L-1)干预下的影响.利用siRNA干扰技术,探究士的宁对hPXR基因沉默后HL-7702细胞中UGT1A4蛋白表达水平的影响.结果 与对照组比,20、40 pmol·L-1 士的宁干预后明显上调UGT1A4、PXR的mRNA和蛋白的表达水平,呈浓度依赖性(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001);但对CAR mRNA和蛋白的表达无明显的影响,差异无统计学意义(P＞0.05).在瞬时共转染hPXR的HL-7702细胞中,20、40 pmol·L-1士的宁干预24 h后能明显上调PXR介导UGT1A4的转录活性,呈浓度依赖性(P＜0.01,P＜0.001);在瞬时共转染hCAR的HL-7702细胞中,各浓度士的宁干预24 h后对CAR介导的UGT1A4转录活性无明显影响,与对照组比,差异无统计学意义(P＞0.05).士的宁对沉默hPXR的HL-7702细胞中UGT1A4蛋白的诱导作用明显减弱,与对照组比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 士的宁对HL-7702中UGT1A4和PXR在转录和蛋白水平有明显的上调作用,对CAR在转录和蛋白水平没有明显影响.士的宁对HL-7702细胞中UGT1A4的诱导作用主要通过PXR调控通路实现.
其他文献
目的 系统评价银屑灵片及其优化方(PSORI-CM01、PSORI-CM02)治疗寻常型银屑病的临床疗效及安全性.方法 计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、维普中文期刊(VIP)、中国生物医学文献数据库(CBM)和万方数据知识服务平台(Wanfang)7个中、英文数据库中有关银屑灵片及其优化方治疗寻常型银屑病的随机对照试验(RCTs)及非随机干预性研究(NRSI),检索年限为数据库建库至2020年10月.2名研究员对检索出的文献进行筛选及提取有效数
目的 鉴别大承气汤在人离体肠道菌群中的体外代谢产物.方法 应用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(HPLC-Q-TOF-MS/MS)鉴别大承气汤体外肠道菌群孵育样品中的代谢产物并推测其转化途径,定量分析其主要成分在48 h内的动态变化情况.结果 从大承气汤中鉴别出48个固有的化学成分、21个代谢产物.大承气汤在肠道菌中发生去糖基化、糖基化、甲基化、羟基化、开环反应和水合反应等多种反应,其中去糖基化是苷类成分的主要转化方式.黄酮类化合物柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷含量下降49.56％、29.25％和90.95％;
目的 基于药效团模型与正负效应双靶标分子对接策略挖掘色氨酸羟化酶1(Tryptophan hydroxylase-1,TPH1)抑制剂相关的中药活性分子.方法 搭建药效团模型、类药性筛选、药代动力学预测、双靶标分子对接、分子动力学模拟于一体的药物筛选平台,从TCM@TAIWAN数据库中发现新型TPH1候选抑制剂.结果命中分子ZINC85626251、ZINC85626260实验数据均表现出良好的抑制活性及类药性,预测命中分子可有效抑制胃肠道相关的TPH1活性,但对中枢神经系统相关TPH2活性抑制作用较小,
如何利用真实世界证据(Real-world evidence,RWE)评价药物的有效性和安全性,已成为国内外药物研发和监管决策等方面共同关注的热点话题.真实世界研究(Real-world research/study,RWR/RWS)不同于临床实践,作为临床研究的一种类型,仍须基于医学伦理并科学开展,保护受试者权益仍是重中之重.知情同意是保障受试者权益的重要路径,做好知情同意非常关键.传统的知情同意方式在开展RWR/RWS过程中可能会导致招募困难或选择偏倚而降低研究结果的普适性,因此作者结合RWR/RWS
目的 利用网络药理学方法探讨保元汤治疗扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)的作用机制.方法 应用中药系统药理学分析平台(TCSMP)及中药分子作用机制的生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)、Pubchem、SwissTargetPrediction、Uniprot等数据库筛选保元汤活性成分及其作用靶点,基于人类基因数据库(GeneCards)、在线《人类孟德尔遗传》数据库(OMIM)获取扩张型心肌病相关靶点,二者相互映射获得药物与疾病共同靶点.利用Cytoscape软
目的 探讨人参皂苷Rb1对小鼠脂性肝细胞模型脂质沉积和氧化应激的影响.方法 采用原位二步灌流法提取小鼠肝原代细胞;以油酸(OA)和棕榈酸(PA)混合培养基制备脂性肝脏原代细胞模型,并同时以人参皂苷Rb1低、中、高剂量(25、50、100 nmol·L-1)进行干预24 h.测定各组细胞中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量;采用油红O染色检测细胞内脂质蓄积情况;DCFH-DA荧光探针法检测细胞ROS水平;Western Blot法检测细胞内过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)、固醇调节元件结合
目的 探讨简单随机、动态均衡随机、最小化法随机3种不同随机方法的均衡性.方法 利用真实临床研究数据进行模拟测试,比较3种不同随机化方法分配结果的组间例数均衡性和非处理因素组间均衡性.结果 在样本量分别为20、100、200、500和1000条件下,动态均衡随机比最小化法和简单随机拥有更好的均衡性,具体表现在组间例数绝对差值、平均边际不均衡值和最大边际不平衡值;而最小化法的均衡性又比简单随机好.此外,动态均衡随机拥有比最小化法更好的随机性.结论 动态均衡随机和最小化法2种动态随机化方法具有良好的均衡性,在小
目的 基于网络药理学方法探讨巴戟天-淫羊藿药对防治老年痴呆的潜在分子作用机制.方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP数据库)收集巴戟天、淫羊藿的化学成分,根据口服生物利用度、类药性、血脑屏障透过率等参数以及结合文献报道筛选其活性成分并预测其作用靶点;通过GeneCard、TTD、DiGSeE等数据库筛选出老年痴呆症相关的疾病靶点,并与活性成分作用靶点取交集即为药物与疾病的共同作用靶点;采用Cytoscape 3.7.1软件构建巴戟天-淫羊藿药对活性成分-共同作用靶点的可视化网络;基于STRI
目的 探讨术前口服芍药甘草汤对预防内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)后胰腺炎(PEP)的临床作用.方法 将2019年9月至2020年9月上海中医药大学附属曙光医院拟行ERCP的患者150例随机分成治疗组(75例)和对照组(75例).2组患者术前均进行常规治疗,在此基础上,对照组术前0.5 h予以吲哚美辛栓肛塞,治疗组在对照组基础上加用芍药甘草汤治疗.观察2组患者术前及术后临床症状评分、腹痛视觉模拟量表(VAS)评分、炎症指标[C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8
目的 评价宣肺平喘化痰通络方治疗支气管哮喘慢性持续期(痰哮证)的临床疗效及对气道炎症和气道高反应性(AHR)的影响.方法 将144例患者随机分为对照组和观察组,每组各72例.对照组给予沙美特罗替卡松粉吸入剂和宣肺平喘化痰通络方模拟颗粒治疗,观察组给予沙美特罗替卡松粉吸入剂和宣肺平喘化痰通络方配方颗粒治疗,2组均连续治疗4周.观察2组患者治疗前后肺功能[第1秒用力呼气容积(FEV1)、呼气流量峰值(PEF)、PEF变异率]、气道炎症[嗜酸性粒细胞(EOS)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-1