【摘 要】
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乳腺炎是泌乳奶牛的常见疾病，每年给养殖企业造成巨大的经济损失。本研究采用不同浓度的脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导奶牛乳腺上皮细胞（mammary alveolar cell-T, MAC-T）的炎症反应，之后，在对照培养基基础上分别添加100μg/m L LPS（LPS）、10 mmol/L的雷帕霉素（RAP）及2种物质联合添加（LPS+RAP）并处理细胞24 h。培
【机 构】
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浙江大学动物科学学院奶业科学研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（31872989）； 国家重点研发计划（2018YFD0501604）；
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乳腺炎是泌乳奶牛的常见疾病，每年给养殖企业造成巨大的经济损失。本研究采用不同浓度的脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导奶牛乳腺上皮细胞（mammary alveolar cell-T, MAC-T）的炎症反应，之后，在对照培养基基础上分别添加100μg/m L LPS（LPS）、10 mmol/L的雷帕霉素（RAP）及2种物质联合添加（LPS+RAP）并处理细胞24 h。培养结束后收集细胞及上清液用于后续测定。结果表明：在不改变细胞活力和凋亡的情况下添加LPS显著提高了上清液中白细胞介素-8（interleukin-8, IL-8）、白细胞介素-1β（interleukin-1β, IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）的浓度（P<0.01）。单独添加雷帕霉素不影响MAC-T细胞上清液中炎症因子的浓度（P>0.05），但显著降低了LPS诱导的IL-1β和TNF-α分泌量（P<0.05）。LPS提高了核转录因子-κB（nuclear factor-κB, NF-κB）通路中p65蛋白的磷酸化水平，但雷帕霉素的添加消除了这种提高作用（P<0.01）。与LPS组相比，LPS+RAP处理降低了MAC-T细胞丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）通路中c-Jun N末端激酶（c-Jun N-terminal kinase, JNK）和p38蛋白的磷酸化水平（P<0.01）。综上所述，雷帕霉素通过NF-κB/MAPK通路缓解了LPS引起的乳腺上皮细胞炎症反应，该结果可为雷帕霉素用于乳腺炎的治疗提供理论参考。
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