纳米银SERS光谱法检测β-半乳糖苷酶活性

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在pH 5.91Na2HPO4-KH2PO4缓冲溶液,X-gal被β-半乳糖苷酶催化分解生成形成具有拉曼活性的靛蓝染料衍生物5-溴-4-氯-3-吲哚,在TCA及银纳米粒子存在条件下,生成的染料分子吸附在银纳米微粒表面,随着β-半乳糖苷酶浓度最大,5-溴-4-氯-3-吲哚的量增多,使SERS活性增强。SERS强度增强值随β-半乳糖苷酶浓度增加而线性递增,据此可建立测定β-半乳糖苷酶的SERS光谱法。在最优条件下,测定β-半乳糖苷酶的线性范围为1.73~34.58U·L-1,线性方程为ΔI597cm-1=15.813c+1.071 7,检出限为1U·L-1。此外本文采用光波法制备的稳定性较好、SERS活性较高银纳米粒子为基底检测β-半乳糖苷酶活性,据此建立一种绿色环保、简便、灵敏、快速测定β-半乳糖苷酶活性的SERS新方法。
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