暖心康改善心肌缺血再灌注后心衰的作用和机制研究

来源 :中华中医药学刊 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bbcat1982
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目的:探讨暖心康通过改善心肌缺血再灌注后(ischemia reperfusion, IR)炎症反应防治心衰的作用和机制。方法:体内实验:采用可逆性结扎左前降支冠状动脉制备心肌缺血再灌注损伤动物模型,小鼠分为三组,假手术组,缺血再灌注组,暖心康组。暖心康组给予暖心康1.65 g/kg灌胃,缺血再灌注组和假手术组给予生理盐水0.1 ml/10 g灌胃。每日灌胃1次,连续5周。超声检测各组小鼠心功能情况;苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining, HE)观察小鼠心脏结构变化;酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay, ELASA)检测小鼠外周血白细胞介素-1β(Interleukin-1β, IL-1β)、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor-alpha, TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6, IL-6)水平;流式细胞技术分析检测小鼠心脏单核浸润情况及M1巨噬细胞种群占比。体外实验:制备暖心康大鼠含药血清及对照血清。实验分为对照组、模型组、暖心康含药血清组,其中对照组采用对照血清培养RAW264.7巨噬细胞,模型组在此基础上给予脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)刺激;暖心康含药血清组则给予LPS刺激后采用暖心康血清培养。实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR, qPCR)检测不同处理后IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子的表达。流式细胞术分析M1型巨噬细胞标志物CD86的平均荧光强度变化。海马代谢仪(Seahorse)检测各组细胞的氧化磷酸化及糖酵解情况。结果:心脏超声显示暖心康能够改善缺血再灌注致心衰小鼠的心功能。HE染色显示暖心康能够减轻心脏结构损伤;暖心康同时能够降低外周血的IL-1β、IL-6、TNF-α水平(P均<0.05),减少M1巨噬细胞种群占比(P<0.05)。体外实验显示,暖心康含药血清能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞向M1巨噬细胞极化,减少IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA的表达水平(P均<0.05)。进一步的实验显示,暖心康抑制LPS刺激后的RAW264.7细胞糖酵解(P均<0.05)。结论:暖心康改善了缺血再灌注后的心肌损伤,阻止心衰的进程,可能与暖心康调控能量代谢过程以抑制巨噬细胞介导的过度炎症反应相关。
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