【摘 要】
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目的 应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术,建立快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药相关基因rpsL和rrs突变的新方法.方法 采用常规药敏试验检测112株结核分枝杆菌临
【机 构】
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杭州市红十字会医院检验科,浙江医学高等专科学校
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目的 应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术,建立快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药相关基因rpsL和rrs突变的新方法.方法 采用常规药敏试验检测112株结核分枝杆菌临床分离株对链霉素的耐药性,建立PCR-SSCP法检测耐药相关基因rpsL和rrs的突变.采用PCR直接测序技术(PCR-DS)确定rpsL和rrs基因突变情况并与PCR-SSCP法检测结果进行比较.结果 112株结核分枝杆菌临床分离株均携带rpsL和rrs基因,52株(46.4％)对链霉素敏感,其中有1株敏感菌株rrs基因PCR-SSCP条带异常,PCR-SSCP方法的特异性为98.1％ (51/52).60株(53.6％)结核分枝杆菌对链霉素耐药,用PCR-SSCP方法分别检出46株(76.6％) rpsL基因和11株(18.3％)rrs基因条带异常,1株同时出现rpsL和rrs基因条带异常,PCR-SSCP检测的灵敏度为93.3％ (56/60).结论 PCR-SSCP方法检测结核分枝杆菌耐药相关基因rpsL和rrs突变的特异性和敏感性高,临床上值得推广应用.
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