【摘 要】
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目的:观察益气化瘀清热方及其拆方对嘌呤霉素氨基核苷(Puromycin aminonucleoside,PAN)损伤体外培养的小鼠足细胞表达TRPC6的影响,探讨不同类中药的作用强度。方法:应用PAN(5
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81273803)
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目的:观察益气化瘀清热方及其拆方对嘌呤霉素氨基核苷(Puromycin aminonucleoside,PAN)损伤体外培养的小鼠足细胞表达TRPC6的影响,探讨不同类中药的作用强度。方法:应用PAN(50μg/mL)刺激体外培养的小鼠足细胞,形成PAN足细胞损伤模型,造模成功后的足细胞随机分为益气组、化瘀组、清热组、复方组、对照组、模型组、空白组,采用RT-PCR和Western Blot法检测各组血清对小鼠足细胞表达TRPC6 mRNA及蛋白的影响。结果:(1)RT-PCR结果显示:空白组与PAN刺激24、48 h的模型组TRPC6mRNA表达差异显著(P<0.05)。含药血清作用24 h后,化瘀组、清热组、复方组表达TRPC6mRNA明显低于对照组(P<0.01)和益气组(P<0.05),而3组之间无显著差异(P>0.05),益气组与对照组也无显著差异(P>0.05)。含药血清作用48 h后,益气组、化瘀组、清热组及复方组表达TRPC6mRNA均显著低于对照组(P<0.05),且4组之间无明显差别(P>0.05)。(2)Wersten印迹结果显示:空白组与PAN刺激24、48 h的模型组TRPC6蛋白表达差异显著(P<0.05)。含药血清作用24 h后,益气组、化瘀组TRPC6蛋白表达低于对照组(P<0.05),清热组、复方组与对照组相比无显著差异(P>0.05),且4组间差异不明显(P>0.05)。各含药血清作用48 h后,益气组、清热组、复方组TRPC6蛋白表达低于对照组(P<0.01),化瘀组与对照组相比无差别(P>0.05);复方组、益气组、清热组3者在TRPC6蛋白表达上无差别(P>0.05);化瘀组TRPC6表达水平高于复方组(P=0.008<0.01),而与益气组、清热组相比无显著差异(P>0.05)。结论:益气化瘀清热方及其拆方均能抑制造模足细胞TRPC6mRNA和蛋白的表达,但不同药物作用于造模足细胞的时间不同,抑制TRPC6表达的作用强度不同。
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