HIV-1整合酶142—288氨基酸蛋白的表达、纯化及抗原性鉴定

• 作 者: 顾园园 叶德富 陈君敏 姚小剑
• 机 构: 福建医科大学附属第一医院血液风湿科,UniversityofManitoba
• 出 处: 中国人兽共患病学报
• 发表日期: 2008年7期
• 关键词: 人类免疫缺陷病毒I型 整合酶 蛋白纯化 human immunodeficiency virus type I integrase protein puri

目的 构建人类免疫缺陷病毒I型（HIV-1）整合酶（IN）142—288氨基酸蛋白的原核表达系统．对其进行表达、纯化及抗原性评价。方法 采用PCR方法以野生型HIV-1IN表达质粒为模板扩增IN142-288氨基酸cDNA片段。BamH I与Xho I双酶切消化后连接到表达载体pGEX-4T1中，构建pGEX-4T1-IN142—288质粒，并进行双酶切与测序鉴定。将该质粒转化大肠埃希菌BL21（DE3），经异丙基-β—D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达。表达产物经液相层析纯化。将纯化后的IN142-2