禽流感病毒 H7N9型实时荧光定量RT-PCR检测方法的研究

• 作 者: 陈勉乔 于浩洋
• 机 构: 深圳市晋百慧生物有限公司
• 出 处: 现代检验医学杂志
• 发表日期: 2016年3期
• 关键词: 禽流感病毒 H7N9 型 实时荧光定量 检测 avian influenza virus H7N9 real-time fluorescence quant
• 基金项目: 深圳市技术创新计划（CYZZ20140605154742155）,深圳市南山技术研发和创意设计项目（KC2014JSJS0018A）.

目的建立一种快速准确诊断禽流感病毒 H7N9型的实时荧光定量 RT-PCR检测方法。方法参照国家生物技术信息中心（NCBI）公布的 H7N9基因 HA序列，设计特异性引物及TaqMan探针；构建阳性重组质粒，验证其最低检测拷贝数、重复性及特异度。结果试验构建的阳性重组质粒，线性关系在6＆#215;102 copies／μl～6＆#215;108 copies／μl范围内检测结果良好；用该方法测得最低拷贝数为600 copies／μl，特异度和重复性（CV＜1％）良好，无交叉反应；用该荧光定量 RT-PCR