肝脏再生增强因子cDNA的克隆及稳定细胞株的建立

• 作 者: 曾晓波 苏先狮
• 机 构: 410011,湖南省长沙,中南大学湘雅二医院肝病研究所,410011,湖南省长沙,中南大学湘雅二医院肝病研究所
• 出 处: 中国基层医药
• 发表日期: 2007年14期
• 关键词: 细胞株 转染 真核表达质粒 生物学活性 稳定细胞株 转染细胞 空质粒 测序 胎肝 RNA

目的 通过对人源肝脏再生增强因子(ALR)cDNA进行克隆及活性的初步鉴定,为基因工程制备重组人肝脏ALR(hALR)提供资料.方法 提取人胎肝总RNA,通过RT-PCR获得hALR cDNA,构建真核表达质粒pcDNA3.1-ALR,转化大肠杆菌扩增质粒.将质粒pcDNA3.1与pcDNA3.1-ALR分别转染HepG2细胞,G418筛选建立稳定细胞株,MTT法检测hALR的生物学活性.结果 测序证实克隆得到的hALR序列完全正确.MTT比色结果,转染hALR的细胞增殖高于转染空质粒和未转染细胞(P＜0.05).结论 hALR具有促肝细胞增殖的作用。