【摘 要】
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人中心蛋白2(Human centrin 2,HsCen2)是一种重要的钙离子结合蛋白。文章通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native polyarylamide gel electrophoresis,native-PAGE)、聚丙烯酰
【机 构】
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山西大学分子科学研究所化学生物学与分子工程教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(20901048;21571117);教育部博士点专项基金(20131401110011)
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人中心蛋白2(Human centrin 2,HsCen2)是一种重要的钙离子结合蛋白。文章通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native polyarylamide gel electrophoresis,native-PAGE)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS polyarylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、DEAE-Sepharose阴离子交换层析、远紫外圆二色光谱(circular dichroism,CD)及荧光光谱的方法,在0.01mol/L Hepes(pH 7.4,25℃),研究了磷酸化修饰对HsCen2与蜂毒素(melittin)结合的影响。结果表明,蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)可以催化人中心蛋白2Ser170磷酸化反应,形成磷酸化的HsCen2(phosphorylated HsCen2,HsCen2p)。磷酸化修饰使得HsCen2的α-螺旋含量明显减少,同时疏水空腔外露程度减弱。另外,HsCen2p中加入蜂毒素使蛋白的α-螺旋含量减少。荧光发射光谱表明HsCen2p与melittin形成1∶1的复合物,其结合能力为(1.5±0.05)×10~5 L/mol。
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