死亡相关蛋白激酶基因启动子甲基化特异性PCR法的建立与初步应用

• 作 者: 王雅丽 姚冬明 林江 钱军 许文荣 钱震 朱照辉 肖高飞 吴
• 机 构: 江苏大学附属人民医院血液科,江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏大学附属人民医院普外科
• 出 处: 江苏大学学报：医学版
• 发表日期: 2009年1期
• 关键词: 死亡相关蛋白激酶 甲基化特异性PCR 甲基化 death-associated protein kinase methylation-specific PCR
• 基金项目: 江苏省医学重点人才资助项目（RC2007035）,江苏大学临床医学科技发展基金资助项目（JLY20080048）,镇江市社会发展基金资助项目（SH2006032）

目的：建立甲基化特异性PCR（MSP）技术检测死亡相关蛋白激酶（DAPK）基因启动子甲基化。方法：设计针对DAPK基因启动子的MSP引物，建立MSP检测体系对甲基化阳性模板进行检测，评价其特异性、重复性和灵敏性，并经测序鉴定。结果：所建立的甲基化MSP方法仅能扩增出甲基化阳性模板，不能扩增出未甲基化阳性模板和未硫化处理的DNA模板；对不同梯度稀释的甲基化阳性模板进行检测，其最大敏感性可达2%；在不同时间进行甲基化MSP检测的结果均一致。结论：成功建立的DAPK基因启动子甲基化MSP检测方法具有良好的特异性