人分化抑制因子3重组腺病毒的制备及鉴定

• 作 者: 庞小娟 赵晓琴 陈芳芳 彭薇 张弛 臧宇辉 罗冰 虞伟 秦浚
• 机 构: 南京师范大学生命科学学院,南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所,南京大学医药生物技术国家重点实验室
• 出 处: 临床检验杂志
• 发表日期: 2010年1期
• 关键词: 细胞分化抑制因子3 重组腺病毒 滴度测定 表达 inhibitors of differentiation 3 recombinant adenovirus
• 基金项目: 江苏省科教兴卫医学重点人才基金课题（RC2007117）,和南京军区医药卫生科研项目重点课题（077Z032）.

目的构建人细胞分化抑制因子3（Id3）重组腺病毒载体，制备并鉴定人Id3重组腺病毒，为研究Id3基因在细胞中的表达及其对细胞功能的影响奠定基础。方法以pUC57-Id3为模板扩增人胁基因，克隆到质粒pUC18中，pUC18-Id3经EcoRI和Hindm双酶切补平之后与载体pAxCAwtit连接，构建重组粘粒载体pAxCAwtit—Id3，包装试剂盒包装重组粘粒，转染大肠埃希菌，坚定正确后大量制备重组pAxCAwtit—Id3，经酶切线性化后，用脂质体法转染IIEK293A细胞，包装成重组腺病毒Ad—Id