【摘 要】
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目的:探讨当归补血汤通过改善足细胞线粒体功能障碍对糖尿病肾病(DKD)大鼠氧化应激及炎症反应的干预作用.方法:SD大鼠随机分为正常组和造模组,造模组采用高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射制备2型糖尿病大鼠模型.成模大鼠随机分为模型组、当归补血汤低剂量(0.72 g·kg-1)组、当归补血汤高剂量(1.44 g·kg-1)组、厄贝沙坦(0.017 g·kg-1)组进行灌胃,正常组及模型组予等体积生理盐水灌胃.药物干预20周后检测各组大鼠尿微量白蛋白与尿肌酐比值(UACR),血清丙二醛(
【机 构】
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河北中医学院,石家庄050200;河北中医学院,石家庄050200;河北省中医院,石家庄050011
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目的:探讨当归补血汤通过改善足细胞线粒体功能障碍对糖尿病肾病(DKD)大鼠氧化应激及炎症反应的干预作用.方法:SD大鼠随机分为正常组和造模组,造模组采用高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射制备2型糖尿病大鼠模型.成模大鼠随机分为模型组、当归补血汤低剂量(0.72 g·kg-1)组、当归补血汤高剂量(1.44 g·kg-1)组、厄贝沙坦(0.017 g·kg-1)组进行灌胃,正常组及模型组予等体积生理盐水灌胃.药物干预20周后检测各组大鼠尿微量白蛋白与尿肌酐比值(UACR),血清丙二醛(MDA)含量,血清锰超氧化物歧化酶(MnSOD)活性;马松(Masson)染色、高碘酸希夫(PAS)染色分别观察肾组织病理形态学变化;透射电镜(TEM)观察足细胞线粒体超微结构变化;二氢乙锭(DHE)荧光探针检测大鼠肾组织活性氧(ROS)表达水平;免疫组化法(IHC)检测大鼠肾组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α),核苷酸结合域样受体蛋白3(NLRP3),肿瘤蛋白-1(WT-1)蛋白表达水平;免疫荧光(IF)三标法检测NLRP3,白细胞介素-1β(IL-1β)与WT-1在足细胞的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Rea1-time PCR)检测大鼠肾组织PGC-1α,NLRP3 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肾组织PGC-1α,MnSOD,NLRP3,IL-1β蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠UACR,MDA含量显著升高,MnSOD活性显著降低(P＜0.01);病理表现为肾小球肥大、基底膜增厚、系膜增生、系膜外基质增多、出现K-W结节、足细胞线粒体肿胀、线粒体嵴走向紊乱、模糊或消失,可见空泡形成;ROS表达量显著增多(P＜0.01);NLRP3及IL-1β在足细胞表达显著升高,WT-1在足细胞表达显著减少;PGC-1αmRNA表达水平显著降低(P＜0.01),PGC-1α,MnSOD蛋白表达水平显著降低(P＜0.01),NLRP3 mRNA表达水平显著升高,NLRP3,IL-1β蛋白表达水平显著升高(P＜0.01).与模型组比较,当归补血汤高剂量组明显降低UACR,MDA含量,升高MnSOD活性(P＜0.05,P＜0.01);明显改善肾组织病理学,改善足细胞线粒体超微结构;减少ROS表达(P＜0.05,P＜0.01);NLRP3及IL-1β在足细胞表达减少且WT-1在足细胞表达增多;升高PGC-1α,MnSOD mRNA及蛋白表达水平,降低NLRP3,IL-1β mRNA及蛋白表达水平(P＜0.05,P＜0.01).结论:当归补血汤可能通过改善DKD大鼠足细胞线粒体功能障碍,缓解氧化应激,减轻炎症反应,起到明显的肾脏保护及延缓病程进展作用.
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