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应用逆转录病毒为载体构建了含人野生型p53基因的重组质粒,并成功地转染ψcrip包装细胞。本实验应用PLXSN为载体,1.8kb野生型p53基因作为插入片段,通过T_4DNA连接酶进行连接。用〔α— ̄(32)P〕dCTP标记野生型p53基因片段(1.8kb)为探针进行原位杂交。筛选出重组体,将其命名为PLXSN-53,然后用该重组体对ψcrip包装细胞进行转染。收集转染后的细胞,准备下一步感染p53突变细胞株研究之用。该质粒的构建和细胞转染实验为进一步研究野生型p53基因的抑癌作用及其表达与调控原理奠定了