狂犬病病毒CVS株G基因和IFN-α基因的克隆及双基因真核表达载体的构建

• 作 者: 李江涛 殷相平 柳纪省 李宝玉 李学瑞 杨彬 兰喜 胡永浩
• 机 构: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃农业大学动物医学院
• 出 处: 动物医学进展
• 发表日期: 2007年9期
• 关键词: 狂犬病痛毒CVS毒株 G基因 Α干扰素 pIRES载体 Rabies virus CVS strain G gene IFN-α plRES vector
• 基金项目: 国家高技术研究发展计划863项目（2006AA10A204）,甘肃省科技攻关项目（2GS0S2-A41-006-02）

从狂犬病病毒CVS毒株致死的小鼠脑组织中提取总RNA,通过RT-PCR获得G基因;以pMD18-T-α质粒为模板,PCR扩增得到IFN-α基因.两个基因和pIRES真核表达载体分别双酶切,连接构建P IRES-G/IFN-α,经PCR、双酶切鉴定和测序证明载体构建成功.测得的G基因序列长1 575 bp,与CVS株G基因氨基酸同源性为98.5%;IFN-α序列长为570 bp,与GenBank中登录号为NM 001017411的IFN-α基因氨基酸同源性为91.6%.