【摘 要】
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选择稳定的内参基因是实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)分析的重要条件.本研究采用不同品种、季节和组织部位葡萄样品为研究材料,利用qPCR测
【机 构】
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中国农业科学院果树研究所,国家落叶果树脱毒中心,兴城,125100
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选择稳定的内参基因是实时荧光定量PCR (real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)分析的重要条件.本研究采用不同品种、季节和组织部位葡萄样品为研究材料,利用qPCR测定了19个候选内参基因相对表达量,并采用GeNorm、NormFinder和BestKeeper等3个软件对候选内参基因表达稳定性进行分析评价.3个软件分析结果表明,表达最稳定的3个内参基因均为GAPDH、UBQ-1和EF1α-1.为验证内参基因稳定性,以筛选出的GAPDH、UBQ-1和EF1α-1为内参,对感染葡萄病毒E(Grapevine virusE,GVE)的不同部位葡萄样品中GVE相对表达量进行qPCR分析.结果 表明,GAPDH、UBQ-1和EF1α-1分别单独作内参和3个基因组合作为内参进行相对定量时,GVE在植株不同部位样品中的相对表达量变化趋势基本一致,表明这3个内参基因在葡萄不同组织部位中稳定表达,适合作为葡萄qPCR分析的内参基因.
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