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目的：分离大鼠胚胎的脊髓神经干细胞进行体外培养，探讨维甲酸（RA）、音猬因子（Shh）诱导其向运动神经元样细胞分化。方法：应用无血清培养技术分离培养脊髓神经干细胞，通过5-溴-2-脱氧尿苷标记、免疫荧光显色检测细胞增殖、分化情况；培养液分组添加Shh、RA或shh＋RA，观察神经干细胞向运动神经元样细胞的分化情况。结果：大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞，分化后可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原；诱导分化后结果显示Shh组未检测到胆碱乙酰转移酶阳性细胞，RA组为20．63％，shh＋RA组为66．84％