肿瘤相关抗原OVA66单克隆抗体的制备和鉴定

• 作 者: 荣婷婷 陈惠娟 张惠珍 刘争春 张勇 王树军 王颖 葛海良
• 机 构: 上海交通大学医学院基础医学院免疫学教研室,上海交通大学医学院上海市免疫学研究所
• 出 处: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 发表日期: 2009年4期
• 关键词: 肿瘤相关抗原 OVA66 单克隆抗体 原核表达 蛋白纯化 ELISA tumor associated antigen OVA66 monoclonal a

目的：制备和鉴定人卵巢癌cDNA文库筛选到的肿瘤相关抗原OVA66的单克隆抗体,为研究其生物学功能提供手段。方法：采用基因重组方法构建pET32b-OVA66重组表达质粒,经大肠杆菌诱导表达OVA66融合蛋白,利用Ni-TED亲和层析技术分离纯化His-OVA66融合蛋白;采用经典的杂交瘤技术制备OVA66单克隆抗体;ELISA和Western blotting鉴定单克隆抗体的生物学和免疫学特性,并对OVA66单克隆抗体在细胞免疫荧光法、流式细胞术和免疫组化等方法中进行了初步应用。结果：成功构建重组表达载