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目的
观察微小RNA(miRNA,miR)-335靶向特异蛋白一员(Sp1)对前列腺癌细胞(LNCaP)增殖的调控。
方法选取LNCaP为研究对象,采用荧光素酶活性实验验证miR-335对Sp1的靶向作用;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中miR-335表达;采用Western blot检测细胞中Sp1蛋白表达;采用噻唑蓝(MTT)法检测LNCaP细胞增殖活性。
结果与前列腺增生上皮细胞BPH-1比较,LNCaP中miR-335表达(0.83±0.22)显著低于BPH-1(2.97±0.51);LNCaP中Sp1蛋白表达(0.92±0.18)显著高于BPH-1(0.31±0.07)。miR-335可与Sp1 3'-非编码区(UTR)特异性结合,降低荧光值。转染miR-335可使LNCaP中miR-335高表达,降低Sp1蛋白表达,并抑制LNCaP细胞增殖活性。同时转染miR-335及Sp1表达质粒可增加LNCaP中Sp1蛋白表达,并部分逆转miR-335对LNCaP细胞增殖的抑制作用。
结论miR-335可通过靶向Sp1抑制前列腺癌细胞LNCaP增殖。