【摘 要】
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目的研究烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对体外培养的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响,探究其潜在机制。方法体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h,分别加入
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科,重庆医科大学组织学与胚胎学教研室,干细胞与组织工程研究室,
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目的研究烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对体外培养的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响,探究其潜在机制。方法体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h,分别加入0.5%、1.0%、2.0%CSE共培养48 h;转化生长因子-β1(TGF-β1)受体抑制剂(SB431542)500 nmol/L作用RLE-6TN细胞株24 h后,加入2.0%CSE共培养48 h。Hoechst染色后观察细胞核的形态学改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测TGF-β1、p-Smad2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3裂解片段(Cleaved Caspase-3)的表达。结果经不同浓度(0.5%、1.0%、2.0%)的CSE作用48 h后,Hoechst染色可见部分凋亡细胞,核发白、固缩、染色质边集等现象;细胞早期凋亡率由(5.270±0.526)%增加至(32.580±0.413)%(P<0.01);TGF-β1、p-Smad2和Cleaved Caspase-3蛋白表达量增加;TGF-β1受体抑制剂(SB431542)干预后,Smad2和Cleaved Caspase-3表达量明显降低(P<0.05)。结论 CSE通过激活TGF-β1/Smad2信号通路,参与调节Cleaved Caspase-3的表达,从而诱导大鼠肺泡上皮细胞的凋亡。
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